Mô tả
1.Probe
PrimeTime® qPCR Probes là các oligonucleotide được gắn với đầu 5’ fluorescent repoter và đầu 3’ là dye quencher. Chúng tôi cung cấp các đầu gắn với chi tiết trong bảng dưới đây
Hiệu suất đảm bảo thấp nhất trong nmol |
Reporter/Quencher |
100 nmol scale |
250 nmol scale |
1 µmol scale |
5’ 6-FAM / ZEN™ / 3’ Iowa Black® FQ |
15 |
25 |
50 |
5’ 6-FAM / 3’ BHQ® 1 |
10 |
25 |
50 |
5’ 6-FAM/ 3’TAMRA |
10 |
25 |
50 |
5’ HEX™ / ZEN™ / 3’ Iowa Black® FQ |
10 |
25 |
50 |
5’ HEX™ / 3’ BHQ® 1 |
10 |
25 |
50 |
5’ YAK / ZEN™ /3’lowa Black® FQ |
NA |
25 |
50 |
5’TET™ / ZEN™ / 3’ Iowa Black® FQ |
10 |
25 |
50 |
5’TET™ / 3’ BHQ® 1 |
10 |
25 |
50 |
5’ JOE™ / ZEN™ / 3’ Iowa Black® FQ |
NA |
8 |
20 |
5’ MAX™ / ZEN™ / 3’ Iowa Black® FQ |
2 |
8 |
20 |
5’TYE™ 563 / 3’ Iowa Black® RQ |
2 |
8 |
20 |
5’TYE™ 665 / 3’ Iowa Black® RQ |
2 |
8 |
20 |
5’TEX™ 615 / 3’ Iowa Black® RQ |
2 |
8 |
20 |
5’ Cy® 5 / TAO™/ 3’ Iowa Black® RQ |
2 |
8 |
20 |
5’ Cy® 5 / 3’ BHQ® 2 |
2 |
8 |
20 |
5’Cy® 3 / 3’ Iowa Black® RQ |
2 |
8 |
20 |
5’Cy® 3 / 3’ BHQ® 2 |
2 |
8 |
20 |
Trong khi các probes truyền thống có độ dài khoảng 20-30 bases giữa fluorophere và quencher,chèn thêm Zen/Tao quencher vào giữa sẽ làm giảm chiều dài của probe xuống còn 9 bases.
https://sg.idtdna.com/pages/education/decoded/article/modification-highlight-zen-internal-quencher
Với chiều dài probe ngắn hơn sẽ giúp
- Giảm tín hiệu nền
- Giảm giá trị Cq
- Cải thiện độ chính xác
- Giúp thiết kế được probes cho vùng giàu AT
- Với việc sử dụng Double-quenched probes sẽ giúp làm tăng độ nhạy và độ chính xác trong các phản ứng qPCR
Các công cụ hỗ trợ KH trong thiết kế primer/probes:
Real time qPCR assay:
https://sg.idtdna.com/scitools/Applications/RealTimePCR/
Predesigned qPCR
https://sg.idtdna.com/site/order/qpcr/predesignedassay
Lựa chọn dye cho các hệ máy:
https://sfvideo.blob.core.windows.net/sitefinity/images/default-source/product-page-images/qpcr/instrument-compatibility.jpg?sfvrsn=ea660c07_4
Brochure qPCR assay:
http://sfvideo.blob.core.windows.net/sitefinity/docs/default-source/flyer/primetime-qpcr-assays.pdf?sfvrsn=cf120907_6
1.2 PrimeTime® qPCR Mini Probes and Eco Probes
Các PrimeTime® Mini qPCR rất lý tưởng cho việc kiểm tra các probes mới và để xác định mức biểu hiện của gen. Đầu dò PrimeTime® Eco qPCR là quy mô lý tưởng cho các nhà nghiên cứu, những người cần phải thực hiện ~ 500 phản ứng để phân tích biểu hiện gen. Sự kết hợp của quy mô vừa và chi phí thấp lý tưởng cho việc kiểm tra ban đầu cho các bộ mẫu lớn. Cả Mini và Eco Probes đều có sẵn như là đầu dò double-quenhed, với 5 'FAM và 3' IBFQ quencher kết hợp với quencher ZEN nội bộ và được vận chuyển trong vòng 3-5 ngày làm việc.
Product |
5’ Dye |
3’ Quencher |
Delivery amount |
Mini |
FAM |
ZEN/IBFQ |
0.5 nmol |
Eco |
FAM |
ZEN/IBFQ |
2.5 nmol |
1.4
MGB Eclipse® Probes and Primers:
Chúng tôi đã kết hợp giữa sản xuất chuyên môn về oligo và chứng chỉ ISO 13485 cho quy trình sản xuất các sản phẩm để cung cấp đầu dò MGB Eclipse® và các mồi GMP để sử dụng trong các xét nghiệm chẩn đoán lâm sàng
Các thành phần qPCR do GMP sản xuất để sử dụng trong chuẩn đoán phân tử và lâm sàng:
-Chuyển từ nghiên cứu sang chuẩn đoán lâm sàng trong khi duy trì hiệu suất xét nghiệm
-Bắt đầu thử nghiệm của bạn thuận lợi hơn với việc giao hàng nhanh và đáng tin cậy
- TIết kiệm chi phí với giá thành hợp lý cho mỗi phản ứng
Đầu do MGB Eclipse là sự kết hợp của chất kết dính rãnh nhỏ ( MGB) giúp ổn định quá trình lai mục tiêu thăm do và tăng nhiệt độ nóng chảy, cho phép sử dụng các đầu dỏ ngắn phù hợp hơn cho phân biệt allelic và nhằm vào những vùng giàu AT trong phản ứng qPCR.
Dye |
Quencher |
Normalized Final Yield (nmol) |
FAM |
MGB Eclipse |
6 |
20 |
50 |
HEX |
MGB Eclipse |
6 |
20 |
50 |
TET |
MGB Eclipse |
6 |
20 |
50 |
YAK |
MGB Eclipse |
6 |
20 |
50 |
GMP Companion Primers |
25 nmol GMP Companion Primer |
80 nmol GMP Companion Primer |
200 nmol GMP Companion Primer |
Brochure:
http://sfvideo.blob.core.windows.net/sitefinity/docs/default-source/flyer/gmp-for-molecular-diagnostics-flyer.pdf?sfvrsn=66a83707_8
http://sfvideo.blob.core.windows.net/sitefinity/docs/default-source/flyer/mgb-eclipse-probes-flyer.pdf?sfvrsn=64a83707_8
2. qPCR Master Mix
PrimeTime® Gene Expression Master Mix là một dung dịch 2X được thiết kế để sử dụng trong qPCR 2 step. Mỗi một order bao gồm một dung dịch master mix 2X (antibody-mediated, hot-start DNA polymerase; dNTPs; MgCl2; enhancers; và stabilizers) và một dye tham chiếu riêng biệt.
Đạt được hiệu quả cao qPCR với tốc độ nhanh, hay các điều kiện singleplex hoặc multiplex.
Bao gồm các kết quả phù hợp từ các thí nghiệm qua đêm với sự ổn định benchtop đặc biệt.
Đạt được hiệu suất tối ưu với mức giá tối ưu
Tìm hiểu về các lựa chọn miễn phí để sử dụng thương mại hoặc chẩn đoán
Product |
Catalog |
#Unit Size |
Reactions |
1 mL PrimeTime® Gene Expression Master Mix |
1055770 |
1 x 1 mL |
100 x 20µL |
5 mL PrimeTime® Gene Expression Master Mix |
1055772 |
1 x 5 mL |
100 x 20µL |
25 mL PrimeTime® Gene Expression Master Mix |
1055771 |
5 x 5 mL |
2500 x 20µL |
Cách sử dụng:
http://sfvideo.blob.core.windows.net/sitefinity/docs/default-source/protocol/primetime-gene-expression-master-mix.pdf?sfvrsn=a4ef3707_8
brochure:
http://sfvideo.blob.core.windows.net/sitefinity/docs/default-source/flyer/primetime-gene-expression-master-mix-flyer.pdf?sfvrsn=b0ab3707_12